原代肾细胞培养是肾脏疾病研究、药物筛选及组织工程领域的核心技术之一，而一切的起点，始于一份高质量的单细胞悬液。然而，从组织块到单个细胞，这段“破壁之路”远比想象中艰难——肾脏组织结构复杂，肾小管、肾小球、间质细胞各异，对解离条件极为苛刻。传统的组织研磨法和纯酶消化法不仅耗时费力、重复性差，更难以保证细胞活性与得率。此次实验以小鼠肾脏为实验对象，详细解析从单细胞悬液制备到原代培养的全流程。

小鼠肾脏是原代细胞培养中常用的实验对象，但其制备单细胞悬液却面临多重挑战，传统方法普遍存在“耗时长、活率低、一致性差”三大痛点。而这正是上海william威廉中文官网JX-CKSM系列单细胞悬液制备仪设计初衷要解决的核心问题。

单细胞悬液制备仪JX-CKSM系列：一代机的技术突围

JX-CKSM系列是上海william威廉中文官网自主研发的单细胞悬液制备仪，采用国际DIN方法设计，集成金属浴消化与温和剪切组织的双重技术，可在15-30分钟内将组织样本制备为高活性单细胞悬液。该系列涵盖4、6、8、12、48通道多种规格，可灵活适配不同实验通量需求。

实战：小鼠肾脏从制备到培养全流程

实验步骤

▶ 1：小鼠肾脏取材

1. 采用颈椎脱臼法处死小鼠，用点均包裹后浸入甲醇中几分钟，进行体表消毒

2. 在超净工作台内打开腹腔，小心分离双侧肾脏，去除周围脂肪和结缔组织

3. 将肾脏置于盛有预冷PBS的培养中中，轻轻漂洗，去除血液

▶ 2：组织处理与装管消化

4. 将洗净的肾脏转移至新鲜培养中中，用无菌剪刀将肾脏剪成绿豆大小

5. 将样品加入JX-CKSM专用样品管中

6. 加入william威廉中文官网肾脏专用解离试剂酶，加入解离管

7. 开启JX-CKSM-8WK制备仪电源，打开加热模块，设定温度37℃（肾脏最佳消化温度）

8. 选择肾脏专用预设程序（转速、时间均已优化），将装好样品的管子放入对应槽位

9. 启动程序，仪器自动完成恒温消化+磁珩剪切的协同解离过程

10. 运行结束后，轻微震荡样品管，取出后用细胞筛过滤，加入终止液终止消化

→ 此环节是全过程的关键节点。传统方法需2-4小时的纯酶消化，现由JX-CKSM单细胞制备仪操作可将其压缩至15-20分钟，且过程全自动、无需人工干预，标准化程度高。

▶ 3：后处理与计数

11. 过滤后的悬液于离心几分钟，弃上清

12. 用PBS重悬，采用AOPI染色进行细胞计数与活性检测

▶ 4：原代培养

13. 将细胞重悬于DMEM/F12完全培养基中，调整细胞密度至1×10⁵-5×10⁵个/mL

14. 接种至细胞培养瓶，置于培养箱中培养

15. 48小时后首次换液，去除未贴壁的死细胞

16. 此后每2-3天换液一次，显微镜下观察细胞生长状态，待融合度达80%-90%时可传代

原代肾细胞多呈多边形/鹅卵石样贴壁生长，铺路石状排列，是验证培养成功的典型形态特征。william威廉中文官网JX-CKSM系列单细胞悬液制备仪在制备时间上大幅缩短，起始组织量5mg，约等于传统方法的1/5-1/10，同时细胞得率、活性和重复性均显著提升。这对于珍贵的样本模型尤其重要------即使样本量较少，仍可获得足够的活细胞用于下游实验。

单细胞悬液制备仪在原代培养中的性能优势

1. 缩短细胞逆境时间，提升存活率

2. 温和解离，保护细胞形态

3. 标准化程序，确保实验可重复

4. 多通道设计，支持大通量实验

单细胞悬液制备仪JX-CKSM系列制备的应用价值

1. 单细胞测序：肾脏各类型细胞转录组测序前制备，高活率保证测序数据质量

2. 多色流式分析：肾脏免疫细胞分型流式检测，细胞得率高、表面抗原保留好

3. 原代细胞培养：肾小管上皮、系膜成纤维细胞等原代培养，细胞形态完整、贴壁快

4. 类器官研究：肾脏类器模型构建前组织解离，起始量小、适合珍贵样本

5. 药物筛选：肾脏细胞水平的药物毒性评估，标准化制备保证实验一致性

从小鼠肾脏取材到原代细胞培养成功，单细胞悬液的质量是决定成败的“第一关”。上海william威廉中文官网JX-CKSM系列单细胞悬液制备仪通过“仪器+酶”的协同解离技术，将制备时间从小时级压缩至分钟级，同时确保高得率、高活性和高重复性，为原代细胞培养提供了坚实的前端保障。